医用空气消毒器之过滤除菌

医用消毒机-医疗器械灭菌效果监测应在在灭菌处理后，存放有效期内进行无菌检验。无菌检验应在洁净度为100级单向流空气区域内进行，应严格遵守无菌操作，避免微生物污染。

一、准备1，洗脱液与培养基无菌性试验:无菌试验前3d，于需-厌养培养基与霉菌培养基内各接种1ml洗脱液，分别置30℃～35℃与20℃～25℃培养72h，应无菌生长。 2，阳性对照管菌液制备: ①在试验前一天取金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26003]的普通琼脂斜面新鲜培养物，接种1环至需-厌氧培养基内，在30℃～35℃培养16h～18h后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至10cfu/ml～100cfu/ml; ②取生孢梭菌[CMCC(B)64941]的需氧菌、厌氧菌培养基新鲜培养物1接种环种于相同培养基内，于30℃～35℃培养 18h～24h后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至10cfu/ml～100cfu/ml; ③取白色念珠菌[CMCC（F）98001]真菌琼脂培养基斜面新鲜培养物1接种环种于相同培养基内，于20℃～25℃培养 24h后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至10cfu/ml～100cfu/ml。

二、取样对缝合针、针头、刀片等小件医疗器械直接取样品各一件分别浸入6管需-厌氧培养管(其中一管作阳性对照)与4管霉菌培养管。培养基用量为15ml/管。对注射器5副，用5ml洗脱液中反复抽吸5次，混和后接种需-厌养菌培养管(共6管，其中1管作阳性对照)与霉菌培养管(共4管)。 接种量：1ml注射器为0.5ml，2ml注射器为1ml，5ml～10ml 注射器为2ml，20ml～50ml注射器为5ml,培养基用量：接种量2ml以下为15ml/管，5ml为40ml/管。对手术钳、镊子等大件医疗器械，取2件用沾有无菌洗脱液的棉拭子反复涂抹采样，将棉拭子投入5ml无菌洗脱液中，将采样液混匀，接种于需-厌氧培养管(共6管，其中1管作阳性对照)与霉菌培养基(共4管)。接种量为1ml/管, 培养基用量为15ml/管。

三、培养在待检样品的需-厌氧培养管中，接种预先准备的金黄色葡萄球菌阳性对照管1:1000稀释1ml，将需-厌氧培养管以及阳性与阴性对照管均于30℃～35℃培养5d，霉菌培养管与阴性对照管于20℃～25℃培养7d，培养期间逐日检查是否有菌生长，如加入供试品后培养基出现混浊或沉淀，经培养后不能从外观上判断时，可取培养液转种入另一支相同的培养基中或斜面培养基上，培养48h～72h后，观察是否再现混浊或在斜面上有无菌落生长，并在转种的同时，取培养液少量，涂片染色，用显微镜观察是否有菌生长。

四、结果判定阳性对照在24h内应有菌生长，阴性对照在培养期间应无菌生长，如需-厌氧菌及霉菌培养管内均为澄清或虽显混浊但经证明并非有菌生长，判为灭菌合格；如需-厌氧菌及霉菌培养管中任何1管显混浊并证实有菌生长，应重新取样，分别同法复试2次，除阳性对照外，其他各管均不得有菌生长，否则判为灭菌不合格。五、注意事项1，送检时间不得超过6h，若样品保存于0℃～4℃，则不得超过24h。2，被采样本表面积＜100cm2取全部表面；被采样本表面积≥100cm2，取100cm2。 3，若消毒因子为化学消毒剂,采样液中应加入相应中和剂。

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